P engujian kadar HMF merupakan metode yang selalu digunakan untuk menguji kesegaran dan keaslian madu. Madu biasanya memiliki kadar dibawah 1 mg/kg namun dapat terus meningkat apabila suhu sekitar mencapai 20°C. Suhu pada sarang lebah dapat mencapai 40°C selama musim panas, dan biasanya kadar HMF menjadi lebih dari 1 mg/kg namun kurang dari 10 mg/kg. Tingginya kadar HMF menandakan pemanasan yang berlebihan selama proses ekstraksi. Beberapa negara menetapkan kadar maksimal HMF sebesar 40 mg/kg. Namun untuk madu yang berasal dari daerah tropis menetapkan kadar HMF tidak boleh lebih dari 80 mg/kg. Hal ini dikarenakan pembentukan HMF yang tergantung dari pH dan suhu. Tingginya kadar HMF pada madu asli dari daerah tropis hampir sama dengan madu palsu, hal ini akan mempersulit untuk membedakan madu murni dan madu palsu dengan menggunakan pengujian kadar HMF saja. Ada 3 metode yang dapat digunakan untuk mengetahui kadar HMF : Pengukuran langsung menggunakan absorbansi HMF pada panja